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染色液的浓度如何测定
更新时间:2019-04-24 点击次数:3242次
染色液主要用途:哺乳动物脑组织的缺血梗塞染色,测定脑梗死灶体积
染色液浓度的测定
A、用肉眼比较见车染料浓度:
将一用于对照的标准液与另一用过的染色液按相同比例稀释后,用肉眼检查法给予鉴定,再用两种溶液之体积计算出染色液之浓度差别。
B、分光光度法测定染料浓度:使用分光光度计。
将染色液之样液稀释后测定其吸光值,再取具有标准染料浓度之对照液以同样比例稀释后测定其吸光值,然后比较这两个吸光值,再计算出生产用之染色液的实际染料浓度。
染料浓度计算方法(克/公升)=吸光值*染料系数*稀释倍数
C、 定期部分更新染色液以调整染色力的方法:
定期的部分更新染色液也可以延长染色液的使用寿命,做法是在一定间隔的时间后将一定量的槽液排放掉,并换入新液,计算新液时应包括流出时带走的染料量,这样便定期的消除了部分杂质,染色液可以在较长时间内保持稳定生产均匀的著色膜。
染色液的原理:
2,3,5-氯化三苯基四氮唑(TTC)是脂溶性光敏感复合物,常用于检测种子的生存能力以及检测哺乳动物组织的缺血梗塞。它是呼吸链中吡啶—核苷结构酶系统的质子受体,能与正常组织中的脱氢酶反应而呈红色。
正常脑组织和有活力种子胚组织活细胞中的脱氢酶可以将 TTC 还原成不溶性的红色稳定的三苯基甲臢(TTF),如果脑组织细胞或胚种细胞死亡或生活力衰退,则不能染色或染色较浅。
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